近些年来，随着基因检测和健康体检的普及，唾液样本由于其无痛采集、采样方便的优点变成了一种非常好的DNA来源样本。一般采集唾液前，为了尽可能提高DNA的得率，会要求采样者半小时内不进食或饮水。那么唾液中到底有多少DNA呢，怎样才能提高唾液DNA的得率呢？抱着这样的疑惑，我们进行了以下实验。
实验目的
探究唾液中的DNA浓度范围以及如何提高唾液DNA的回收量。
实验材料
1、唾液样本；
3、旋涡振荡器（越新仪器，XH-C）
4、台式离心机（eppendorf Centrifuge 5415 D）
6、电泳仪（北京六一仪器厂，DYY-6C型 ）
实验内容
本次实验测试了5位实验者在不进食或饮水2小时后的唾液DNA浓度以及1位实验者不进食或饮水不同时间后的唾液DNA浓度（为防止连续采集唾液对DNA浓度会有影响，改为每天采集一次）。
1、用洁净的一次性水杯收集1-2 ml唾液，转移 μl唾液到一个洁净的1.5 ml离心管中，加入 μl Buffer L5、剧烈摇晃离心管3－5次，再旋涡振荡30秒混匀，更高速（≥12000 rpm）离心1分钟。
2、将离心上清液倒入核酸纯化柱中，盖上管盖，12000 rpm离心30秒，弃滤液。
3、在核酸纯化柱中加入700 μl Buffer WA，盖上管盖，12000 rpm离心30秒，弃滤液。
4、在核酸纯化柱中加入800 μl Buffer WB，盖上管盖，12000 rpm离心30秒，弃滤液。
5.10 rpm空离1分钟，去除残留液体。
6、将核酸纯化柱置于一个洁净的1.5 ml离心管中，在纯化柱的膜加入100 μl Buffer TE，盖上管盖，温静置2分钟，12000 rpm离心30秒，得到DNA。
实验结果：
1、在超微量分光光度计上用Buffer TE调零，测量提取好的DNA，结果如下：
表一：不同人提供的唾液样本提取的DNA浓度
A、B、C、D、E是5位实验者在不进食、饮水2小时后提供的唾液样本所提取出的唾液DNA。
表二：同一人在不同条件下提供的唾液样本提取的DNA浓度
条件1、2、3是同一位实验者在不进食、饮水不同时间后（0.5小时、1小时、1.5小时）提供的唾液样本所提取出的唾液DNA；
4和5是同一唾液样本，是该实验者在不进食、饮水2小时后提供的唾液样本，4和1、2、3一样是直接进行提取，5则是在添加Buffer L5试剂后置于37℃摇床震荡2小时后（模拟唾液采集器采集唾液后运输的效果）再提取的唾液DNA。1、2、3是同一位实验者在不进食、饮水不同时间后（0.5小时、1小时、1.5小时）提供的唾液样本所提取出的唾液DNA；
2、在1%的琼脂糖凝胶上，加入5 μl提取到的唾液DNA电泳15 min，结果如下：
A、B、C、D、E是5位实验者在不进食、饮水2小时后提供的唾液样本所提取出的唾液DNA的电泳结果；
1、2、3是同一位实验者在不进食、饮水后的不同时间（0.5小时、1小时、1.5小时）提供的唾液样本所提取出的唾液DNA的电泳结果；
4和5是同一唾液样本，是该实验者在不进食、饮水2小时后提供的唾液样本所提取出的唾液DNA的电泳结果，4和1、2、3一样是直接进行提取，5则是在添加Buffer L5试剂后置于37℃摇床振荡2小时后再提取的唾液DNA。
讨论与分析：
1、从表一数据分析可知，不同个体提供的唾液样本中DNA含量差异非常大，5位实验者中，更低的只提取了0.9μgDNA，而更高的则提取到了11μgDNA，有10倍的差异。
2、从表二1、2、3、4的数据分析可知，对于同一个体而言，唾液中DNA的含量相对比较稳定。通过延长不进食、饮水的时间，唾液DNA含量确实有所提高，因此可以通过选择合适的时间段采集唾液以达到提高唾液DNA浓度的目的。
4、更后我们总结如下：
1）不同个体提供的唾液样本中DNA含量差异非常大，从μl提取到的DNA，数量大概在1~11μg的范围波动。
2）由于唾液中DNA的含量本质上是唾液中所含的口腔上皮细胞和白细胞数量所决定的。因此我们猜测这种差异终究还是由不同个体的差异所决定：一个原因是有的人的口腔上皮细胞容易脱落，有的人却不容易脱落，就非常类似于不同的人的头皮屑数量的差异。其次就是口腔溃疡或者牙龈炎等因素又会非常大地影响唾液中白细胞的数量。
4）当我们碰到了唾液中DNA含量低的样本时，还有一个补救的方法，就是多提取几管同一个样本中的DNA，然后在操作步骤2时将各个不同管的离心上清多次滤过同一个核酸纯化柱，这样就可以让DNA富集到同一个纯化柱上，达到提高DNA浓度的目的了。
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